北京恒奧德儀器儀表有限公司
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抑菌圈測(cè)量 菌落計(jì)數(shù)分析儀菌落計(jì)數(shù)儀原理?操作
是一種用于自動(dòng)測(cè)量抗生素或抗菌物質(zhì)在瓊脂培養(yǎng)基上形成的抑菌圈直徑的設(shè)備,其核心原理基于抗菌成分?jǐn)U散抑制細(xì)菌生長(zhǎng),通過(guò)圖像識(shí)別技術(shù)實(shí)現(xiàn)高精度、自動(dòng)化分析。以下是其使用步驟與原理的綜合說(shuō)明:
?核心原理?
抑菌圈的形成源于抗菌物質(zhì)(如抗生素、抗菌劑)在瓊脂培養(yǎng)基中的擴(kuò)散。當(dāng)含有抗菌成分的紙片、牛津杯或樣品置于接種了敏感細(xì)菌的平板時(shí),抗菌物質(zhì)會(huì)向周?chē)鷶U(kuò)散,形成濃度梯度。在抑菌圈區(qū)域內(nèi),抗菌濃度足以抑制細(xì)菌生長(zhǎng),從而形成透明的無(wú)菌區(qū)域。抑菌圈的直徑或面積與以下因素密切相關(guān):
?抗菌物質(zhì)的濃度?:濃度越高,抑菌圈通常越大。
?抗菌物質(zhì)的擴(kuò)散速率?:擴(kuò)散越快,抑菌圈越寬。
?細(xì)菌的敏感性?:不同菌種對(duì)同一抗菌物質(zhì)的敏感程度不同,如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等常用標(biāo)準(zhǔn)菌株。
?培養(yǎng)條件?:溫度、時(shí)間等影響擴(kuò)散和生長(zhǎng)。
現(xiàn)代抑菌圈測(cè)量?jī)x采用?高分辨率成像系統(tǒng)?(如CCD相機(jī)、雙光源掃描)獲取平板圖像,通過(guò)智能算法(如圓弧擬合、邊緣檢測(cè))自動(dòng)識(shí)別抑菌圈邊界,測(cè)量直徑、面積等參數(shù),誤差可控制在0.5%以?xún)?nèi),并支持?jǐn)?shù)據(jù)審計(jì)追蹤與報(bào)告生成?
?使用步驟?
?滅菌處理?
對(duì)所有實(shí)驗(yàn)器具(如培養(yǎng)皿、移液器、紙片)、菌液及培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌,避免雜菌污染影響結(jié)果?
?菌懸液制備?
將標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)菌(如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌)接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24小時(shí)后,刮取單菌落制備成濃度一致的菌懸液(通常為0.5麥?zhǔn)蠞岫龋?/strong>?
?樣品放置與培養(yǎng)?
將滅菌后的抗菌紙片、牛津杯或樣品載體置于已均勻涂布菌液的瓊脂平板
將平板倒置放入37℃恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)24–48小時(shí),使抗菌物質(zhì)充分?jǐn)U散并形清晰的抑菌圈?
?儀器測(cè)量?
將培養(yǎng)后的平板放入抑菌圈測(cè)量?jī)x,啟動(dòng)掃描程序。
儀器自動(dòng)捕捉圖像,通過(guò)軟件識(shí)別抑菌圈邊緣,選擇測(cè)量模式(自動(dòng)、擬圓或手動(dòng)校正)?
系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算直徑、面積,并與內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)(如CLSI標(biāo)準(zhǔn))比對(duì),評(píng)估抗菌效價(jià)?
?數(shù)據(jù)分析與報(bào)告?
定性判斷:抑菌圈直徑≥5毫米通常視為陽(yáng)性結(jié)果,表明樣品具有抗菌活性?
定量分析:通過(guò)抑菌圈大小與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較,折算出抗生素效價(jià)(如IU/mL)?
結(jié)果可導(dǎo)出為Excel或PDF報(bào)告,支持?jǐn)?shù)據(jù)追溯與GLP規(guī)范?
?補(bǔ)充說(shuō)明?
?常用方法?:抑菌圈法包括K-B法(濾紙片法)、牛津杯法和打孔法,其中K-B法因標(biāo)準(zhǔn)化程度高,廣泛用于藥敏試驗(yàn)?
?儀器優(yōu)勢(shì)?:全自動(dòng)設(shè)備可同時(shí)處理多個(gè)平板,計(jì)數(shù)速度達(dá)150–800個(gè)菌落/秒,顯著提升效率,減少人為誤差?
綜上,抑菌圈測(cè)量?jī)x將傳統(tǒng)微生物檢測(cè)與現(xiàn)代圖像分析技術(shù)結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了抗菌性能評(píng)估的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化與高通量
